PCR實驗室風(fēng)淋室與凈化設(shè)備要求
當(dāng)前位置：首頁 >> 風(fēng)淋室技術(shù)文章 >> 正文PCR實驗室風(fēng)淋室與凈化設(shè)備要求:
實驗室凈化設(shè)備，比如臭氧、紫外線燈、風(fēng)淋室（包括貨淋室）、傳遞窗、超凈工作臺、FFU、高效送風(fēng)口、互聯(lián)鎖等凈化輔助設(shè)備?？諝膺^濾系統(tǒng)，有初效過濾器、中效過濾器、高效過濾器等。
PCR實驗室有哪些凈化要求？
分類：實驗室家具
一、PCR實驗（experiment)室并沒有嚴格的凈化要求，但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能（maybe)性，宜采用全送全排的氣流組織形式。實驗室凈化由于潔凈實驗室-生物安全實驗室內(nèi)操作對象是危險性的微生物，對人體、動植物或環(huán)境具有危害，必須通過采用合理的空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)，保持潔凈實驗室-生物安全實驗室的相對負壓環(huán)境無論何時都不被破壞，以保證實驗室內(nèi)危險性微生物不能向外部環(huán)境中擴散。同時，要嚴格控制（control)送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
2.1試劑貯存和準備區(qū)
二、實驗（experiment)區(qū)主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原料(raw material)必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。 對與氣流壓力的控制（control)，本區(qū)并沒有嚴格的要求。
標本制備區(qū)
試劑貯存和準備區(qū)
標本制備區(qū)
擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)
緩沖區(qū)
傳遞窗
擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)
三、本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進行。
四、該區(qū)域主要進行的操作為擴增片段的測定。凈化實驗室必須控制實驗室的潔凈度，對新風(fēng)進行過濾，使實驗室達到一定的凈化要求。其中排風(fēng)系統(tǒng)是重點，對于保證實驗室相對負壓環(huán)境和有效過濾室內(nèi)污染排風(fēng)起著重要的作用。
PCR實驗室設(shè)計建設(shè)中容易出現(xiàn)的問題(實驗室家具)：
1、PCR實驗室的空氣流向必須嚴格按照試劑儲存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進行，防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前的區(qū)域。需要嚴格的通風(fēng)設(shè)計，若通風(fēng)設(shè)計不合理，會使風(fēng)速流向混亂，甚至危害人們健康。
2、人流路徑與物流路徑設(shè)計不合理：
進入實驗室區(qū)域工作人員應(yīng)該按照以下路徑：公共清潔區(qū)——更衣間（更換潔凈服）——緩沖間——風(fēng)淋室——污染實驗區(qū)。
工作人員退出實驗室的路徑為：污染試驗區(qū)——緩沖間——風(fēng)淋室（有條件的可設(shè)置）——更衣間——公共清潔區(qū)
PCR實驗室污染方式及處理（實驗室家具）
分類： 實驗室家具
有實驗室的地方，就不可避免的會出現(xiàn)實驗室污染。實驗室的污染，不僅會影響實驗與科研的質(zhì)量和效果,還對實驗室工作人員的身體健康有損害，PCR實驗室的污染原因及解決方法。
PCR實驗室污染
標本間交叉污染：標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染；標本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導(dǎo)致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散，導(dǎo)致彼此間的污染。
PCR試劑的污染：主要是由于在PCR試劑配制過程中，由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。
PCR擴增產(chǎn)物污染：這是PCR反應(yīng)中最主要最常見的污染問題。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大，遠遠高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可造成假陽就可形成假陽性。
還有一種容易忽視，最可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染；在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠，在操作時比較劇烈地搖動反應(yīng)管，開蓋時、吸樣時及污染進樣槍的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠而污染。
實驗室中克隆質(zhì)粒的污染：在分子生物學(xué)實驗室及某些用克隆質(zhì)粒做陽性對照的檢驗室，這個問題也比較常見，因為克隆質(zhì)粒在單位容積內(nèi)含量相當(dāng)高，另外在純化過程中需用較多的用具及試劑，而且在活細胞內(nèi)的質(zhì)粒，由于活細胞的生長繁殖的簡便性及具有很強的生命力，其污染可能性也很大。
PCR實驗室設(shè)計方案
分類： 實驗室裝修
1、主體結(jié)構(gòu)：
主體為彩鋼板、鋁（Al)合金(熔點660)型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金
50內(nèi)圓角鋁（Al)，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。
2、標準的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：
將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增，產(chǎn)物分析(Analyse)四個獨立的實驗（experiment)區(qū)。凈化實驗室控制系統(tǒng)是整個潔凈實驗室安全運行的神經(jīng)中樞,由于潔凈實驗室-生物安全實驗室的實驗對象是危險性的微生物，出于嚴格控制污染的原則，它要求以最少的維護人員，運用最優(yōu)化的管理維護手段，來實時監(jiān)控每一個實驗室中設(shè)備所處的物理環(huán)境，保證實驗室運行過程中始終處于相對負壓環(huán)境，防止危險性微生物外泄。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)，使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低（reduce)擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
可打開緩沖區(qū)，緩沖區(qū)和 PCR 擴增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實驗（experiment)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量(定義:單位時間內(nèi)空氣的流通量)可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。
3、消毒：
在三個實驗（experiment)區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。潔凈實驗室無菌試驗室、生物安全實驗室必須保證人身安全、環(huán)境安全、廢棄物安全和樣本安全，能長期而安全地運行，同時還為需要實驗室工作人員提供一個舒適、而良好的工作環(huán)境。
在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū)還設(shè)置移動紫外線（Ultraviolet rays)燈，對實驗（experiment)桌進行局部（part)消毒。
4、不銹鋼(不銹耐酸鋼)傳遞（transmission)窗：
試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染（人物分流）。
5、地面
地面建議使用聚氯乙烯(Polyvinyl chloride)卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進行清掃，耐腐蝕(釋義:指腐爛、消失、侵蝕等)。
